Dú Zanardo
quarta-feira, 12 de setembro de 2012
terça-feira, 14 de agosto de 2012
http://www.youtube.com/watch?v=wIKjyBG3HwY/ (Parte 1)
http://www.youtube.com/watch?v=UrRrD4YzmG4 (Parte 2)
PCR - Amplificação de DNA in vitro Básico
Fundamentos da Técnica de PCR
Em 1993, Kary Mullis, um geneticista ao serviço da Cetus, uma empresa de Biotecnologia da Califórnia, recebeu o prémio Nobel da Química pelo desenvolvimento de um método que permite sintetizar, em poucas horas e in vitro, uma grande quantidade de um determinado fragmento de DNA. Esta técnica faz parte integrante da moderna biotecnologia molecular, tendo trazido um enorme progresso a áreas como o diagnóstico de doenças, medicina forense entre muitas outras para além da Investigação em Biologia.
A técnica de PCR (polymerase chain reaction - reacção em cadeia pela polimerase) baseia-se no processo de replicação de DNA que ocorre in vivo . Durante o PCR são usadas elevadas temperaturas de forma a separar as moléculas de DNA em duas cadeias simples, permitindo então a ligação de oligonucleótidos iniciadores (primers), também em cadeia simples e geralmente constituídos por 15 a 30 nucleótidos, obtidos por síntese química. Para amplificar uma determinada região são necessários dois iniciadores complementares das sequências que flanqueiam o fragmento de DNA a amplificar, nos seus terminais 3', de modo a permitir a actuação da DNA polimerase durante a síntese da cadeia complementar, usando como molde cada uma das duas cadeias simples constituintes do DNA a amplificar (figura 1).
- Desnaturação do DNA alvo pelo calor (tipicamente 1 minuto a 94-96ºC), de modo a separar as duas cadeias
- Associação dos iniciadores por ligações de hidrogénio ao DNA alvo em cadeia simples. Para permitir essa associação, a mistura de reacção é arrefecida (tipicamente a temperaturas entre 50 e 65ºC, durante 1 minuto; a temperatura a usar depende da % GC da sequência a amplificar)
- Extensão dos iniciadores através da síntese da cadeia complementar de cada cadeia molde, catalisada pela DNA polimerase (tipicamente 1 minuto a 72ºC)
Biologia é a ciência
que estuda os seres vivos. Debruça-se sobre o funcionamento dinâmico dos
organismos desde uma escala molecular subcelular até o nível populacional e interacional,
tanto intraespecíficamente quanto interespecíficamente, bem como a interação da
vida com seu ambiente
físico-químico. O estudo destas dinâmicas ao longo do tempo é chamado, de forma
geral, de biologia evolutiva e contempla o estudo da
origem das espécies
e populações, bem como das unidades hereditárias mendelianas, os genes. A biologia abrange
um espectro amplo de áreas acadêmicas frequentemente consideradas disciplinas
independentes, mas que, no seu conjunto, estudam a vida nas mais variadas escalas.
A vida é estudada à escala atômica
e molecular
pela biologia molecular, pela bioquímica
e pela genética molecular, no que se refere à célula
pela biologia celular e à escala multicelular
pela fisiologia,
pela anatomia
e pela histologia.
A biologia do desenvolvimento estuda a vida
ao nível do desenvolvimento ou ontogenia do organismo individual.
Subindo na escala para grupos de mais que um
organismo, a genética estuda as bases da hereditariedade
e da variação entre indivíduos. A etologia
estuda o comportamento dos indivíduos. A genética populacional estuda a dinâmica
dos alelos
nas população,
enquanto que a sistemática trabalha com linhagens
de muitas espécies.
As ligações de indivíduos, populações e espécies entre si e com os seus habitats
são estudadas pela ecologia e as origens de tais interações pela biologia evolutiva.
Uma nova área, altamente especulativa, a astrobiologia
(ou xenobiologia ou ainda exobiologia)
estuda a possibilidade de vida para lá do nosso planeta. A biologia clínica constitui a área especializada
da biologia profissional, para Diagnose em saúde
e qualidade de vida, dos processos orgânicos eticamente consagrados.
Os ramos
da Biologia são:
- Zoologia
- Helmintologia
- Malacologia
- Entomologia
- Ictiologia
- Herpetologia
- Ornitologia
- Mastozoologia
- Botânica
- Microbiologia
- Micologia
- Parasitologia
- Bacteriologia
- Virologia
- Citologia ou Biologia Celular
- Genética
- Genética clássica
- Genética molecular
- Genética populacional
- Biologia Molecular
- Sistemática
- Biologia Evolutiva
- Fisiologia
- Ecologia
- Biologia de Sistemas
- Biologia da Conservação
- Bioética
- Biologia do Desenvolvimento
- Histologia
- Etologia
- Imunologia
- Biotecnologia
- Paleontologia
- Etnobiologia
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